酶濃度對酶促反應速率的影響
酶促反應速率與酶分子的濃度成正比。當底物分子濃度足夠高時，酶分子越多，底物轉化的速率越快。但事實上，當酶濃度很高時，并不保持這種關系，曲線逐漸趨向平緩。根據分析，這可能是高濃度的底物夾帶有許多的抑制劑所致。
底物濃度對酶促反應速率的影響
在生化反應中，若酶的濃度為定值，底物的起始濃度較低時，酶促反應速率與底物濃度成正比，即隨底物濃度的增加而增加。當所有的酶與底物結合生成中間產物后，即使再增加底物濃度，中間產物濃度也不會增加，酶促反應速率也不增加。還可以得出，在底物濃度相同的條件下，酶促反應速率與酶的初始濃度成正比。酶的初始濃度大，其酶促反應速率就大。
在實際測定中，即使酶濃度足夠高，隨底物濃度的升高，酶促反應速率并沒有因此增加，甚至受到抑制。其原因是：高濃度底物降低了水的有效濃度，降低了分子的擴散性，從而降低了酶促反應速率。過量的底物聚集在酶分子上，生成無活性的中間產物，不能釋放出酶分子，從而也會降低反應速率。
溫度對酶促反應速率的影響
各種酶在***適的溫度范圍內，酶活性***強，酶促反應速率***大。在適宜的溫度范圍內，溫度每升高10℃，酶促反應速率可以相應提高1～2倍。
不同生物體內酶的***適溫度不同。如動物組織中各種酶的***適溫度為37～40℃；微生物體內各種酶的***適溫度為25～60℃，但也有例外，如黑曲糖化酶的***適溫度為62～64℃；巨大芽孢桿菌、短乳酸桿菌、產氣桿菌等體內的葡萄糖異構酶的***適溫度為80℃；枯草桿菌的液化型淀粉酶的***適溫度為85～94℃。
可見，一些芽孢桿菌的酶的熱穩定性較高。過高或過低的溫度都會降低酶的催化效率，即降低酶促反應的速率。
***適溫度在60℃以下的酶，當溫度達到60～80℃時，大部分酶被破壞，發生不可逆變性；當溫度接近100℃時，酶的催化作用完全喪失。
pH對酶促反應速率的影響
酶在***適pH范圍內表現出活性，大于或小于***適pH，都會降低酶的活性。
主要表現在兩個方面：
①改變底物分子和酶分子的帶電狀態，從而影響酶和底物的結合；
②過高或過低的pH都會影響酶的穩定性，進而使酶遭受不可逆破壞。
激活劑對酶促反應速率的影響
能激活酶的物質稱為酶的激活劑。
激活劑種類很多，主要有：
①無機陽離子，如鈉離子、鉀離子、銅離子、鈣離子等；
②無機陰離子，如氯離子、溴離子、碘離子、硫酸鹽離子、磷酸鹽離子等；
③有機化合物，如維生素C、半胱氨酸、還原性谷胱甘肽等。
許多酶只有當某一種適當的激活劑存在時，才表現出催化活性或強化其催化活性，這稱為對酶的激活作用。而有些酶被合成后呈現無活性狀態，這種酶稱為酶原。它須***經過適當的激活劑激活后才具活性。
抑制劑對酶促反應速率的影響
凡能使酶的活性下降而不引起酶蛋白變性的物質稱作酶的抑制劑。使酶變性失活（稱為酶的鈍化）的因素如強酸、強堿等，不屬于抑制劑。它可降低酶促反應速率。酶的抑制劑有重金屬離子、一氧化碳、硫化氫、氫氰酸、氟化物、碘化乙酸、生物堿、染料、對氯***苯甲酸、二異丙基氟磷酸、乙二***四乙酸、表面活性劑等。
對酶促反應的抑制可分為競爭性抑制和非競爭性抑制。與底物結構類似的物質爭先與酶的活性中心結合，從而降低酶促反應速率，這種作用稱為競爭性抑制。
競爭性抑制是可逆性抑制，通過增加底物濃度***終可解除抑制，恢復酶的活性。與底物結構類似的物質稱為競爭性抑制劑。
抑制劑與酶活性中心以外的位點結合后，底物仍可與酶活性中心結合，但酶不顯示活性，這種作用稱為非競爭性抑制。
非競爭性抑制是不可逆的，增加底物濃度并不能解除對酶活性的抑制。與酶活性中心以外的位點結合的抑制劑，稱為非競爭性抑制劑。
有的物質既可作為一種酶的抑制劑，又可作為另一種酶的激活劑。
